药学论文-紫外分光光度法测定翻白草中总黄酮的含量.doc

上传人:lo****88 文档编号:105466 发布时间:2022-05-20 03:16:29 格式:DOC 页数:3 大小:9.66KB
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1、药学论文-紫外分光光度法测定翻白草中总黄酮的含量摘要目的探讨翻白草中总黄酮的含量测定方法。方法以硝酸铝、亚硝酸钠和氢氧化钠为显色剂,采用紫外分光光度计测定翻白草中总黄酮的含量。结果最佳检测波长为510nm,芦丁浓度在20 50 mg/L范围内,吸光度与质量浓度呈良好的线性关系,回归方程为y=7.7457x+0.0009(r=0.9996),平均回收率为99.52%,RSD为1.23%。结论紫外分光光度法测定翻白草总黄酮简单易行。结果稳定可靠。关键词黄酮类化合物分光光度法紫外中草药摘要:目的研究王不留行中总黄酮含量的测定方法。方法以ALC L3nano 2NaOH为显色剂,采用紫外分光光度法测定

2、翻白草中总黄酮的含量。结果最佳检测波长为510nm,芦丁质量浓度在2050m g/l范围内,吸光度与质量浓度呈良好的线性关系,回归方程为y=7.7457x+0.0009(r=0.9996),平均回收率为99.52%,RSD为1.23%。结论用紫外分光光度法测定翻白草中总黄酮的含量简便、准确、灵敏。关键词:黄酮;分光光度法,紫外分光光度计;植物,药用翻白草为蔷薇科植物的干燥全草,植物各部位均含有鞣质和黄酮类化合物1,具有降血脂、抗菌、止泻、增强免疫功能的作用2。采用紫外分光光度法测定翻白草中总黄酮的含量。旨在为翻白草药材及其制剂的质量控制提供科学依据。1.材料翻白草全草采自吉林省龙井市铜佛寺镇,

3、经延边大学药学院生药学教研室卢副教授鉴定为真翻白草;芦丁对照品购自中国药品生物制品检定所。电子天平、753紫外分光光度计为上海精密科学仪器有限公司产品;REE-52C水浴锅是北京医疗器械总厂的产品;旋转薄膜蒸发器是上海亚荣生化仪器厂的产品;202型电热鼓风恒温干燥箱是江苏恒丰仪器厂的产品。试剂都是AR级的。2方法和结果2.1对照品溶液的制备准确称取10.0mg 105干燥至恒重的芦丁标准品,置于100mL容量瓶中,加入700mL/L乙醇,微热,冷却,再加入700mL/L乙醇稀释至刻度,摇匀,得质量浓度为0.10g/L的芦丁对照品溶液,低温保存备用。2.2供试品溶液的制备准确称取翻白草100g,

4、用700mL/L乙醇回流提取,回收溶剂,得提取物。将提取物用适量的水溶解,用乙醚脱脂,放入冰箱冷却,产生绿色沉淀,将过滤得到的滤液浓缩,干燥,得到棕黄色粉末。准确称取20.0mg 105干燥至恒质量的黄酮样品,用700mL/L乙醇定容至100mL。2.3选择波长,准确量取5 ml对照溶液和5mL供试品溶液,分别置于25mL容量瓶中,加入1.0ml 50g/L的亚硝酸钠溶液,摇匀,静置6min。加入1.0ml 100g/L的硝酸铝溶液,摇匀,静置6min,加入10.0ml 40g/L的氢氧化钠溶液,然后加水至刻度,摇匀,静置15min,在200 700 nm波长范围内扫描,结果显示两种溶液在51

5、0nm处均有最大吸收。其他成分不干扰测定。2.4绘制标准曲线准确吸取0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL芦丁标准溶液,置于25mL容量瓶中,加入1.0ml 50g/L亚硝酸钠溶液,摇匀,静置6min,加入1.0ml 100g/L硝酸铝溶液,摇匀,静置6min。加入10.0ml 40g/L氢氧化钠溶液,加700mL/L乙醇至刻度,摇匀,静置15min,注入样品,在510nm波长处测量吸收值(用不含芦丁的空白管控制调零)。得到回归方程:y = 7.7457x+0.0009 (r = 0.996)。结果表明,芦丁的质量浓度在2050mg/l范围内呈良好的线性关系。2.5精密度实验取参比

6、溶液,在波长510nm处测量5次吸收值。结果表明,平均吸收值为0.252,RSD为0.54%(n=6),表明该方法准确。2.6稳定性实验取样品溶液,在0、10、30、60、90和120分钟时测量吸收值。结果表明,总黄酮与铝离子形成的红色络合物在1h内稳定,RSD为1.21%(n=6)。2.7重现性试验准确称取药材样品1.0g,一式5份,进行平行试验,测定510nm波长处的吸收值。结果相对标准偏差为3.03%。2.8回收率实验准确称取105干燥至恒质量的芦丁对照品100mg,置于100mL容量瓶中,用700mL/L乙醇溶解,稀释至刻度,摇匀,得芦丁原液。已知总黄酮含量的五批样品,各取0.5g,置

7、于100mL磨口锥形瓶中。加入上述芦丁原液10mL,加入700mL/L乙醇30mL,摇匀,在510nm波长处测定吸收值,根据回归方程计算。结果表明,添加样品的平均回收率为99.52%,RSD为1.23%(表1)。表1添加样品回收率实验结果2.9样品的测定准确称取0.5g研磨样品,置于100mL研磨锥形瓶中。按2.2项下的方法制备供试品溶液,用同样方法平行制备3份。准确吸取5mL供试品溶液,按2.4项下的方法操作,在波长510nm处测定供试品溶液的吸收值,根据回归方程计算处理,见含量平均值为3.23mg,RSD为1.86%。3讨论了以芦丁为对照品,硝酸铝、亚硝酸钠和氢氧化钠为显色剂。紫外分光光度法测定翻白草中总黄酮的含量,具有简单、易操作、结果稳定可靠等优点。同时还可以分析测定单个黄酮类化合物。【参考文献】【1】钟海军。翻白草的化学成分J.中草药,2000,31 (70): 488。2邹。翻白草的研究进展

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