药学论文-紫外分光光度法测定石蒜鳞茎的总生物碱含量.doc

上传人:lo****88 文档编号:105469 发布时间:2022-05-20 02:03:02 格式:DOC 页数:4 大小:12.33KB
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1、 药学论文-紫外分光光度法测定石蒜鳞茎中的总生物碱作者:李亚忠,袁,【摘要】目的建立一种简便快速测定石蒜鳞茎中总生物碱的方法,为石蒜鳞茎的质量控制提供依据。 方法以加兰他敏为对照品,采用紫外分光光度法,测定波长为289 nm。 结果加兰他敏在20.4 102.0 g/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系,回归方程为y = 0.0084x-0.0227,r = 0.999 9 (n = 5)。回收率为99.8%,RSD = 1.44%。结果在5小时内稳定,RSD = 0.64%;不同来源的石蒜鳞茎总生物碱含量差异较大,栽培石蒜鳞茎总生物碱含量可达到并超过野生石蒜鳞茎。 结论该方法稳定、快速、简便,

2、效果良好。 【关键词】石蒜;总生物碱;紫外分光光度法测定石蒜鳞茎中的总生物碱摘要:目的建立测定石蒜鳞茎中总生物碱的有效方法。方法提取样品中的总生物碱,于289 nm波长处检测。结果加兰他敏的线性关系良好(r=0.999 9),回收率为99.8%。测量结果在5小时内是一致的。不同群体的鳞茎中总生物碱含量不同。结论该方法简便、有效、快速,不同人群总生物碱含量存在差异。关键词:石蒜;总生物碱;紫外分光光度法石蒜是石蒜科石蒜属多年生草本植物,主要分布在长江流域和西南省份。 据本草纲目等记载,石蒜具有解毒、祛痰、利尿、催吐的作用,主要用于痈、疮、恶性肿瘤、咽喉肿痛、水肿。 石蒜鳞茎中含有石蒜碱、加兰他敏

3、、他泽汀、石蒜碱、雨花碱、石蒜碱、维他汀、朱顶红碱等。 Lyricine是阿米巴痢疾药吐根替代物的原料,也有一定的抗癌作用。加兰他敏和力可宁是临床上治疗脊髓灰质炎后遗症和恢复神经功能的重要药物。 1995年版中国药典记载,氢溴酸加兰他敏作为原料和注射剂已成功用于治疗脊髓灰质炎后遗症、重症肌无力、肠麻痹和术后唤醒剂。 近年来,国内外已将其用于轻中度阿尔茨海默病(AD)的治疗。 加兰他敏作为第二代胆碱酯酶抑制剂,因其药效持续时间长、不良反应少、给药方便而日益受到世界各国研究者和临床医生的青睐1 5 目前,国内外对石蒜的研究主要集中在石蒜生物碱的成分分析、引种栽培和临床功效等方面6 9 何等10,1

4、1采用分光光度法分别测定石蒜碱和氢溴酸加兰他敏,但石蒜鳞茎中总生物碱含量的测定方法未见报道。石蒜鳞茎中总生物碱含量的测定对于研究石蒜生物碱代谢、控制石蒜质量、合理栽培、采收和提高提取率具有重要意义。 本论文的主要目的是建立一种稳定、快速、简便、满意的石蒜鳞茎总生物碱含量测定方法,为石蒜鳞茎的质量分析提供参考。 同时,利用该方法对不同栽培方式和野生石蒜鳞茎中的总生物碱含量进行了测定和比较。 1设备UV-2501PC分光光度计(日本岛津公司);电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);加兰他敏对照品(中国药品生物制品检定所);所用试剂均为国产分析纯。 取盛开的开花植物的鳞茎,切块,55 60烘干1

5、2小时,捣碎,过80目筛备用。 石蒜鳞茎来自四个不同的地方。 来自南京汤山和南京紫金山的两个野生居群和来自江苏省中国科学院植物研究所的两个不同栽培样品。 方法与结果2.1供试品溶液的制备:称取12.000 g石蒜鳞茎粉末(过80目筛),置于平底烧瓶中,加入12 ml 10%NaOH溶液,静置15 min,加入50 ml乙酸乙酯(P0.900),摇匀,置于80水浴中,保持回流。 第一次回流2小时,第二次回流1小时,第三次回流1小时 合并滤液,减压浓缩至干,用甲醇定容至25 ml。过滤该溶液后,用移液枪准确吸取50 l于10 ml容量瓶中,用甲醇定容至10 ml,备用。 2.2波长扫描以甲醇为空白

6、对照,在200 700波长范围内扫描标准参比溶液、供试品溶液和空白参比溶液。 结果表明,前两者在(2892) nm处有最大吸收,吸收峰相同,而空白对照溶液在289 nm处几乎没有吸收,因此本实验选择289nm作为测量波长。 参见图1。 2.3在稳定性实验室温度下,取40.8 g/ml参考溶液,分别在1、2、3、4、5小时后于289 nm处测量吸光度。 结果5h内稳定,RSD=0.64% 2.4用标准曲线准确称取0.0255g加兰他敏对照品,置于25 ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,得1 020 g/ml对照品溶液。 准确量取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8和1.0毫升对照溶液于10毫升

7、容量瓶中,加甲醇至刻度。 以甲醇为空白,在289 nm处测量吸光度。 以取样量为横坐标,吸光度值为纵坐标,计算出回归方程Y=0.008 4X-0.022 7,r=0.999 9(n=5)。加兰他敏在20.4102g/ml浓度范围内与吸光度值呈良好的线性关系。 结果如图2所示。 2.5精密度实验:取5份标准参比溶液0.5 ml,按2.4的测定方法配制标准试液和空白参比溶液,在289 nm波长处测定吸光度,RSD为0.51%,表明精密度良好。 1.样品2。控制3。甲醇图1波长扫描图(略)图2加兰他敏标准曲线(略)2.6样品回收率实验用100 l移液枪取已知总生物碱含量的石蒜鳞茎样品溶液一式五份,置

8、于10 ml容量瓶中,分别加入0.3 ml浓度为1020g/ml的对照溶液。 用甲醇填充每个容量瓶至刻度,摇匀,依法测量,计算其回收率。加样平均回收率为99.8%,RSD=1.44%。 2.7样品中总生物碱的测定取不同来源的样品,按2.1的方法制备供试品溶液和空白对照溶液,在289 nm波长处测定吸光度,计算总生物碱的相对含量。 从表1可以看出,不同来源的石蒜鳞茎总生物碱含量不同。 中山植物园梅林栽培居群石蒜鳞茎中总生物碱含量最高。南京紫金山野生种群总生物碱含量最低。 表1不同居群石蒜鳞茎中总生物碱的含量(略)3讨论紫外分光光度法是根据生物碱在紫外区某一波长有最大吸收的原理,其吸收与生物碱含量

成正比。 该方法已成功应用于多种中草药中总生物碱的测定12 14 石蒜生物碱大多溶于水、乙醇、乙酸乙酯、氯仿等。 用水提取的药粉容易糊化;用酸性水溶液提取容易导致加兰他敏等水溶性石蒜生物碱在后期提取过程中的损失。 因此,本研究采用亲脂性有机溶剂提取法,从提取液中回收溶剂后得到总生物碱,尽量减少生物碱的损失。 根据总生物碱的测定结果,不同的生长环境对石蒜鳞茎中总生物碱的含量有很大的影响。 野生石蒜居群鳞茎中总生物碱含量差异较大,可能是由于环境条件的差异引起植物能量和物质代谢的变化,进而影响生物碱代谢的变化。栽培居群石蒜鳞茎总生物碱含量可达到并超过野生居群。 研究结果可为石蒜鳞茎的质量分析和进一步

研究合理的栽培条件提供参考。 【参考文献】【1】国家中医药管理局中药编委会。中药M。上海上海科学技术出版社1999 8:207。贾先辉,周同水,秦始皇,等.石蒜科生物碱的药理研究J.中医杂志,2001,19 (6): 573。3阮龙溪。石蒜科植物生物碱的研究进展J.药学通报,1988年,23 (8): 453。4加兰他敏治疗轻中度阿尔茨海默病的随机双盲对照研究J.中国神经。北京化学工业出版社2005: 446。吴,李爱珍,等.反相高效液相色谱法测定石蒜中加兰他敏的含量J.中华中医药杂志,2005,30 (7): 523。7张璐,23 (3): 375 .8马广恩。加兰他敏治疗老年期痴呆的研究概况J.药学进展,1998,22 (3): 1531。9方玲,鄂,叶.紫外分光光度法测定盐酸加兰他敏片的含量及含量均匀度J.陈。石蒜碱的纸分离及分光光度测定J.药学杂志,1963,10 (1): 1。11赵庆国,吴素缇,王赢,等.不同品种和产地黄连总生物碱含量的测定J.时珍中药,2001,12 (11): 99。27 (1): 50.程华,余龙江,胡琼月,等.分光光度法测定黄连不同部位总生物碱含量J.时珍中药,2006,17 (3): 364。14孙文基,谢世昌。天然药物成分的定量分析M。

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